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當(dāng)前位置:首頁產(chǎn)品中心生化檢測試劑盒-常量法土壤系列BC2995-100T/48S土壤亞硝酸還原酶檢測試劑盒

土壤亞硝酸還原酶檢測試劑盒
產(chǎn)品簡介:

儲存條件
2-8℃
土壤亞硝酸還原酶檢測試劑盒
有效期
6個月
單位

英文名稱
Soil Nitrite Reductase(S-NiR)Activity Assay Kit
別名
土壤亞硝酸還原酶試劑盒 土壤亞硝酸還原酶測試盒
檢測方法
微量法 Spectrophotometer/Microplate Reader
規(guī)格
100T/48S

產(chǎn)品型號:BC2995-100T/48S

更新時間:2025-08-26

廠商性質(zhì):生產(chǎn)廠家

訪 問 量 :1805

服務(wù)熱線

010-50973130

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產(chǎn)品介紹

土壤亞硝酸還原酶(S-NiR)活性檢測試劑盒說明書

微量法

注意:本產(chǎn)品試劑有所變動,請注意并嚴(yán)格按照該說明書操作。

貨號:BC2995

規(guī)格:100T/48S

產(chǎn)品組成:使用前請認(rèn)真核對試劑體積與瓶內(nèi)體積是否一致,有疑問請及時聯(lián)系索萊寶工作人員。

試劑名稱

規(guī)格

保存條件

試劑一

粉劑×1

2-8℃保存

試劑二

粉劑×1

2-8℃保存

試劑三

粉劑×1

2-8℃保存

試劑四

液體15mL×1

2-8℃保存

試劑五

液體15 mL×1

2-8℃保存

標(biāo)準(zhǔn)品

液體1mL×1

2-8℃保存

溶液的配制:

1、 試劑一:臨用前加入1mL蒸餾水充分溶解,2-8保存2周。臨用前根據(jù)用量用蒸餾水稀釋100倍,現(xiàn)用現(xiàn)配;

2、 試劑二:臨用前加15mL蒸餾水備用,2-8保存2周;

3、 試劑三:臨用前加15mL蒸餾水溶解,此溶液為飽和溶液,取上清使用即可。用不完的試劑2-8保存2周;

4、 標(biāo)準(zhǔn)品:10μmol/mL 亞*標(biāo)準(zhǔn)液。

產(chǎn)品說明:

土壤亞硝酸還原酶(Solid-Nitrite reductase,S-NiR)是反硝化作用中的關(guān)鍵酶之一,它是由土壤反硝化細(xì)菌產(chǎn)生的一種還原酶類,可將NO2-還原為NO,它的活性反映了生物降解過程中氮素的轉(zhuǎn)化效率,為氮素轉(zhuǎn)化規(guī)律的研究提供一定的依據(jù)。

亞硝酸還原酶可將NO2-還原為NO,使樣本中參與重氮化反應(yīng)生成紫紅色化合物的NO2-減少,即540nm處吸光值的變化可反應(yīng)土壤中亞硝酸還原酶的活性。

注意:實驗之前建議選擇2-3個預(yù)期差異大的樣本做預(yù)實驗。如果樣本吸光值不在測量范圍內(nèi)建議稀釋或者增加樣本量進(jìn)行檢測。

需自備的儀器和用品:

可見分光光度計/酶標(biāo)儀、低溫離心機(jī)、水浴鍋、可調(diào)式移液器、微量玻璃比色皿/96孔板、30-50目篩、研缽、冰和蒸餾水。

操作步驟:

一、樣本處理(可適當(dāng)調(diào)整待測樣本量,具體比例可以參考文獻(xiàn))

新鮮土樣自然風(fēng)干或37烘箱烘干,過30-50目篩。

二、測定步驟

1、 分光光度計/酶標(biāo)儀預(yù)熱30min 以上,調(diào)節(jié)波長至540nm,分光光度計蒸餾水調(diào)零。

2、 標(biāo)準(zhǔn)液的稀釋:將標(biāo)準(zhǔn)液用蒸餾水稀釋至0.8、0.6、0.40.2、0.1、0.05μmol/mL的標(biāo)準(zhǔn)液。

序號

稀釋前濃度(µmol/mL

標(biāo)準(zhǔn)液體積(µL

蒸餾水體積(µL

稀釋后濃度(µmol/mL

1

10

100

900

1

2

1

160

40

0.8

3

1

120

80

0.6

4

1

200

300

0.4

5

0.4

200

200

0.2

6

0.2

200

200

0.1

7

0.1

200

200

0.05

備注:實驗中每個標(biāo)準(zhǔn)管需100µL標(biāo)準(zhǔn)溶液。

3、 樣本測定:

試劑名稱

無基質(zhì)管

空白管1

對照管

測定管

標(biāo)準(zhǔn)管

空白管2

風(fēng)干土樣(g

-

-

0.05

0.05

-

-

蒸餾水(μL

-

100

100

-

-

-

試劑一(μL

100

-

-

100

-

-

試劑二(μL

100

100

100

100

-

-


充分混勻后,25水浴準(zhǔn)確反應(yīng)3h

-

-

試劑三(μL

100

100

100

100

-

-


旋渦震蕩30s10000rpm,4,離心10min

-

-

上清液(μL

100

100

100

100

-

-

標(biāo)準(zhǔn)品(μL

-

-

-

-

100

-

試劑四(μL

100

100

100

100

100

100

試劑五(μL

100

100

100

100

100

100

蒸餾水(μL

-

-

-

-

-

100

充分混勻,室溫放置15min后吸取200μL于微量玻璃比色皿或96孔板中,測定540nm各管吸光值,分別記為A無基質(zhì)管、A空白管1A對照管、A測定管、A標(biāo)準(zhǔn)管和A空白管2,計算ΔA測定=A無基質(zhì)管-A空白管1-A測定管-A對照管),ΔA標(biāo)準(zhǔn)=A標(biāo)準(zhǔn)管-A空白管2(標(biāo)準(zhǔn)曲線、無基質(zhì)管、空白管1、空白管2只需做1-2次)。

三、S-NiR計算

1. 標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制:

根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)管的濃度(x,μmol/mL)和吸光度ΔA標(biāo)準(zhǔn)(yΔA標(biāo)準(zhǔn)),建立標(biāo)準(zhǔn)曲線。根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線,將ΔA測定(yΔA測定)帶入公式計算樣本濃度(x,μmol/mL)。

2. S-NiR的計算:

酶活單位定義:每g土樣每天還原1μmol NO2ˉ的量為一個酶活力單位。

S-NiRU/g 土樣)=x×V反應(yīng)÷W÷T=2.4×x÷W

T:反應(yīng)時間,3h=1/8d;V反應(yīng):反應(yīng)體系體積,0.3mLW:土樣質(zhì)量,g。

相關(guān)系列產(chǎn)品:

BC3010/BC3015  土壤羥胺還原酶(S-HR)活性檢測試劑盒

BC1970/BC1975  土壤木質(zhì)素過氧化物酶(S-Lip)活性檢測試劑盒

BC4030/BC4035  土壤β-1,4-葡聚糖酶/纖維二糖苷酶(S-C1)活性檢測試劑盒

BC4020/BC4025  土壤亮*酸氨基肽酶(S-LAP)活性檢測試劑盒

BC0240/BC0245  土壤蔗糖酶(S-SC)活性檢測試劑盒

BC3100/BC3105  土壤硝酸還原酶(S-NR)活性檢測試劑盒

 

土壤亞硝酸還原酶檢測試劑盒 土壤亞硝酸還原酶檢測試劑盒

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